问题:可以将不同批号或试剂盒内的同一试剂混用吗?
回答:不可以。
问题:在包被板使用前必须洗吗?
回答:不是必须,但推荐使用,因为如果省略此步骤精确度可能会降低。
问题:孵育时间延长或缩短可以吗?
回答:孵育时间必须严格按照说明书操作,才能得到最佳的结果。
问题:实验必须重复一次吗?
回答:不必须,但对于每个样本和标准品建议做复孔。
问题:背景色过高是什么原因?
回答:造成背景色过高主要有以下几点原因:
1)不正确的洗涤
洗涤不充分或省略洗涤步骤中的任何一步均会导致背景色过高。
解决方法:检查洗涤缓冲液的体积并确保完成所有的洗涤步骤;确保洗涤缓冲液的正确稀释和正确使用。
2)底物污染
确保在使用前,底物不被金属离子或氧化剂污染;
在实验时留存一些额外的底物
底物本身不应该有颜色
3)稀释液污染
我们的大多数稀释液均含有蛋白,在首次开瓶时可能会造成污染。在从瓶中取液体时一定要用 “灭菌” 的枪头
4) 底物曝光
底物曝光会使底物变成兰色,因此在加入板内之前要保存在暗处(即试剂瓶内)
5) 偶合物的错误稀释
偶合物浓度过高会造成高背景色,因此要严格按照产品说明书稀释
6) 错误的孵育时间和温度
必须严格按照产品说明书来确定孵育时间和温度
7) 包被板保存不当
如果包被板只用了一部分,一定要正确保存剩余的板条。